L Latar Belakang: Periodontitis merupakan suatu peradangan pada gingiva dan jaringan pendukung gigi yang disebabkan oleh bakteri pada plak subgingiva seperti Aggregatibacter actinomycetemcomitans dan Fusobacterium nucleatum. Bonggol nanas (Ananas comosus) adalah salah satu limbah dari tanaman buah nanas. Eksrak bonggol nanas mengandung alkaloid, flavonoid, saponin dan enzim bromelin yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri penyebab penyakit periodontal. Tujuan: Untuk mengetahui uji daya hambat ekstrak bonggol nanas terhadap pertumbuhan serta perlekatan biofilm Aggregatibacter actinomycetemcomitans dan Fusobacterium nucleatum. Metode: Penelitian eksperimental laboratoris dengan metode difusi sumuran agar dan melakukan uji biofilm untuk melihat kemampuan ekstrak bonggol nanas (Ananas comosus) dengan konsentrasi 100%, 50%, 25%, 12.5%, 6.25% dan 3.12% menggunakan 96 well-plate yang diinkubasi selama 1 jam, 6 jam, dan 24 jam pada suhu 37ËšC kemudian diberi pewarnaan crsytal violet lalu diukur dengan menggunakan microplate reader. Hasil: Uji normalitas dengan metode Shapiro-Wilk menunjukkan data terdistribusi normal (p>0.05). Uji ANOVA satu jalan dan uji Post Hoc menunjukkan terdapat perbedaan bermakna (p<0.05) antara kemampuan ekstrak bonggol nanas dengan antar konsentrasi dalam menghambat bakteri dan biofilm Aggregatibacter actinomycetemcomitans dan Fusobacterium nucleatum. Kesimpulan: Ekstrak bonggol nanas dengan konsentrasi 100% dapat menghambat pertumbuhan bakteri Aggregatibacter actinomycetemcomitans serta dapat menghambat bakteri Fusobacterium nucleatum dengan konsentrasi 50% dan 100%. Hasil pengujian biofilm assay dengan pengukuran optical density (OD) menunjukkan setiap konsentrasi ekstrak bonggol nanas dapat menghambat densitas biofilm Aggregatibacter actinomycetemcomitans dan Fusobacterium nucleatum.