I Indonesia dikenal sebagai negara yang memiliki keanekaragaman jenis tumbuh umbuhan. Salah satu tumbuhan yang banyak dan mudah didapatkan di Indonesia adalah tanaman kamboja (Plumeria acuminata). Tanaman ini dikenal sebagai tanaman hias dan aroma terapi. Namun belum banyak masyarakat yang mengetahui bahwa tanaman ini juga memiliki potensi besar sebagai bahan obatobatan, serta antiseptik untuk mengatasi penyakit di dalam rongga mulut. Karies merupakan penyakit pada rongga mulut yang disebabkan oleh bakteri Streptococcus mutans. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui besar daya hambat dari ekstrak etanol Plumeria acuminata terhadap Streptococcus mutans yang dibiakan pada media agar darah dengan menggunakan metode difusi sumuran dan diukur dengan melihat zona hambat yang terbentuk dari 3 konsentrasi ekstrak etanol Plumeria acuminata yang berbeda yaitu 1,25%, 2,5%, dan 5%, yang diinkubasi selama 24, 48, dan 72 jam, akuades dan klorheksidin 0.2% digunakan sebagai kontrol. Hasil zona hambat yang ditunjukkan pada konsentrasi 1,25%, 2,5%, dan 5% memiliki rata-rata zona hambat sebesar 17,58 mm, 18,06 mm, dan 19,23 mm. Berdasarkan hasil uji statistik diketahui bahwa pada konsentrasi 5% memiliki daya antibakteri yang signifikan dengan klorheksidin 0.2% yang memiliki zona hambat 20,16 mm. Pada hasil uji statistik juga diketahui bahwa ekstrak etanol Plumeria acuminata memiliki nilai siginifikansi sebesar 0.027 (p<0.05) yang menunjukkan adanya pengaruh signifikan terhadap Streptococcus mutans.